荧光定量pcr技术的介绍?

    荧光定量pcr技术的介绍?小编来回答：荧光定量是通过杀灭荧光源,使试剂发出荧光,从而诱导对应的dna的复制,从而检测到dna的结构变化，他的荧光源一般是react荧光抗体,目前在荧光定量的实验中使用react检测基因序列的变化。

    照相时候用uv基本上是不利用荧光的,react应该是同等的适用的,有时候直接不要uv,只需要保留dna变化,一般需要四倍以上pcr才会有荧光变化出来,所以大多数情况下是没有荧光的。

    荧光定量可以用来检测转录组、信号通路组、外显子组的转录或翻译能力的变化等,这些转录组数据以及信号通路的数据将决定在荧光实验方面的分析结果，特别是基因组dna的反转录活动,在转录组数据分析中具有一定的重要意义。

    肯定有荧光啊,但并不是所有发出的荧光都对应的染色质dna的二级结构变化，然后需要特定的基因组大于三万组进行定量,一般来说含量较高的一级结构会比较容易被检测出来,定性或者定量都能用。

    如果有测定多组样品,建议单独测定单组进行实验,单个样品的突变位点在一个样品里面,例如含有250bp突变的对应二级dna序列里面,可以只测定单个sampo2-2的二级序列变化,避免单个突变整组都测,耗时更长,还有大大增加了毒性,变数太多了。

    也可以采用多平台同时检测检测多个样品的序列变化,例如多个软件一起检测,因为研究环境要求不同,比如单独通过slc50检测c端序列突变量,要求c端内包含1bp序列和3p外显子,结果可能很严格,仅能是测一级序列变化不能含有三级序列突变。

    但双碱基组合检测三级序列突变可能要求很严格，综上,双碱基检测三级序列突变可能较有难度,可能得与检测样品样本,检测方法,检测步骤等等相结合,进行综合分析检测。

    具体可以与样品有关,例如酶切比较的试剂盒,因为酶切速度快,酶切后每一个碱基的突变位点都会被检测,用特定的检测软件来测含有酶切位点突变的dna序列，也有类似turnitin的酶切仪器,虽然酶切速度慢,但检测的位点比较多,检测更严格。

    小编认为荧光定量pcr比较好用,测的也挺好,可能相比双碱基定量稍差一点，有答案提到md33,我觉得可能这个因素可能比较影响结果，另外样品的p值要足够大,也不能太小,高于md33的较好。

    如果只是想看看基因表达的变化情况,一般用react,并不需要切割染色体,只是用ohsci下载看看复制后的dna的形态特征，最常用的是pcr,使用pcr可以完成所有的定量工作,不过目前全基因组pcr才刚刚成熟,国内还没有大规模应用。