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细胞划痕迁移检测
技术介绍
细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
细胞迁移与免疫反应、组织修复、胚胎发育、血管生成、新陈代谢、肿瘤转移等具有密切关系，其机制与细胞本身（EMT、MET）状态和环境（生长因子、趋化因子等）有关。细胞迁移与侵袭机制的研究有助于再生医学的发展和病理状态的逆转，在临床组织修复、炎症反应、病理过程阻断等方面具有应用价值。弗元生物从细胞状态（EMT、MET等）、环境因素两个方面通过划痕实验、Transwell等方法检测细胞在特定情况下迁移（肿瘤侵袭）的能力，并从机制上进行进一步探索。
实验流程
实验步骤
1．先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2．在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3．第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4．用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。
5．放入37度5% CO2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。
案例：实验结果展示
