血管形成体外模型可分为细胞水平的增殖实验、迁移实验和管腔形成实验,以及器官水平的人胎盘血管段培养模型和大鼠动脉环模型。目前通常所说的血管形成实验是指管腔形成实验。管腔形成反映毛细血管的早期过程,是体外检查内皮细胞功能最完整的指标。
血管形成过程中内皮细胞会形成细胞条索,然后形成管腔,体外在特定条件下如基质胶、胶原等培养时也能形成管腔。药物通过抑制管腔形成或使形成的管腔断裂来达到抑制血管形成的作用。借助计算机软件计算小管数及小管之间的连接数及小管的长度和面积,可定量分析药物对管腔形成的影响。
1. ***天matrigel(BD,354230)放入4℃冰箱过夜。
2. 第二天待matrigel冻融后,离心数分钟。
3. 冰上操作(matrigel不能凝固)。matrigel用预冷枪头混匀,EP管提前预冷,每500μl分装。
4. 96孔板提前预冷,每孔加入50μl matrigel,避免产生气泡。在37℃孵箱放置45分钟。
5. 当细胞长满70-80%时,消化下来,并用含10%FBS的DMEM重悬,每孔加入50μl重悬液,浓度为10000-60000/孔细胞,重复三孔。
6. 37℃孵育,四小时后可见血管形成。
1. 客户提供:细胞。
2. 公司提供:基本实验步骤、实验统计数据、实验图片结果。