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革兰氏染色
技术介绍
革兰氏染色法可用来观察细菌的形态并鉴别细菌;在选择药物方面有一定的参考价值;革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素，两者的致病作用不同，与致病性也有关。革兰氏阳性菌呈蓝色或蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
实验流程
脱蜡至水—革兰氏染色—脱水封片-显微镜镜检
实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、革兰氏染色：切片滴加革兰氏染液A滴染10s-30s，水洗，甩干；滴加革兰氏染液B1min，水洗，甩干；巴氏吸管吸取革兰氏染液C从载玻片磨砂面一端冲洗组织进行分化，至切片流下的革兰氏染液C呈无色即可，水洗，甩干；将切片浸革兰氏染液D溶液1s水洗，镜检，烤箱烤干。
3、脱水：将烤干的切片快速入三缸无水乙醇快速脱水，依次1s、3s、5s。
4、透明封片：切片放入干净的二甲苯5min透明，中性树胶封片。
5、显微镜镜检，图像采集分析。
案例：结果展示
革兰氏染色-小鼠肠道
结果判读
革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
送样运输要求
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输，细菌涂片常温运输。
注意事项
1、染色过程中的革兰氏染液C分化是关键步骤，需注意分化程度。
2、尽量不要重复染色，分化液在脱去片子颜色的同时也改变了细胞壁的通透性，影响了***结果的准确性。
3、冬季气温较低时，染色时间可适当延长。
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