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ATP染色
技术介绍
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸，并放出能量。磷酸和钠离子结合，在酶活性处形成无色的磷酸钙，磷酸钙经氯化钴处理形成磷酸钴，再经硫化铵处理形成棕黑色的硫化钴沉淀在酶活性部位。用碱作前孵育处理时，仅白肌纤维出现阳性反应，这对肌球蛋白ATP酶来说是特异性的。
实验流程
冰冻切片入水-ATP染色-脱水封片-显微镜镜检。
实验步骤
1、未经固定的新鲜组织冰冻切片自然晾干，组化笔画圈圈住组织，滴加PH10.4的孵育液孵育5min，倾去孵育液，不水洗直接滴加PH 9.4的孵育液孵育30 min，室温下进行并加盖。
2、倾去孵育液，切片直接依次入3缸CaCL2溶液浸染，每次2min。
3、切片直接入硝酸钴溶液浸染5min，5缸自来水浸洗，每缸20s。
4、现配1%硫化铵溶液(先取5ml纯水，再用巴氏吸管取1滴浓的硫化铵溶液加入，混匀即可，配好后立即使用)滴染或浸染30s，3缸自来水浸洗，每缸20s。
5、切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯透明5min ，中性树胶封片。
6、显微镜镜检，图像采集分析。
案例：实验结果展示
结果判读
Ⅰ型肌纤维呈浅灰色或无色，Ⅱ型肌纤维呈深灰色或黑色。
送样运输要求
新鲜组织干冰运输，冰冻切片
注意事项
1、切片一定要是新鲜组织的冰冻切片，不可以固定。
2、Tris碱、氯化钙粉剂常温保存，硫化铵常温避光保存，ATP钠盐-20℃保存，其它染液4℃
保存，使用前先复常温。
3、工作液和1%硫化铵溶液要现配现用，不能保存。
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