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油红O染色
技术介绍
油红O对脂滴的染色机制一般认为是物理学上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂质染色，即油红O先溶于60%异丙醇中，然后切片浸入油红O染液中时，油红O在组织脂质的溶解度较60%异丙醇中的溶解度高，所以在染色时油红O从60%异丙醇中转移入脂质中使脂滴显示红色。
实验流程
冰冻切片晾干-油红染色-分化-苏木素染色-分化-返蓝-甘油明胶封片-显微镜镜检。
实验步骤
1、新鲜冰冻切片固定：将冰冻切片复温干燥，固定液中固定15min，自来水洗，晾干。
2、油红染色：切片入油红染液浸染8-10min (加盖避光)。
3、背景分化：取出切片，停留3s后依次浸入两缸60%异丙醇分化，各3s、5s。切片依次浸入2缸纯水中浸洗，各10s。
4、苏木素染色：取出切片，停留3s后浸入苏木素复染3-5min，3缸纯水浸洗，各5s、10s、30s。分化液（以60%酒精为溶剂）分化2-8s，2缸蒸馏水洗各10s，返蓝液返蓝1s，将切片轻轻浸入2缸自来水中浸洗，各5s、10s，镜检染色效果。
5、封片：甘油明胶封片剂封片。
6、显微镜镜检，图像采集分析。
案例：实验结果展示
实验结果判读
脂滴橙红色至鲜红色，细胞核浅蓝色
送样运输要求
1、样本放置于＞10倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰；
2、新鲜组织干冰运输。
3、冰冻切片-20℃运输。
注意事项
1、如果是新鲜组织冰冻切片，需要先固定再染色；如果组织是固定以后冰冻切片，可以将切片晾干以后，直接染色。
2、整个操作过程中注意动作轻缓，不宜动作太大，以免脂肪丢失或者移位。
3、染色结果不能长期保存，封片后应尽快观察及拍照。
4、甘油明胶常温下为凝固状，一般60℃烤箱中保存。封片后如有气泡不能按压玻片也不宜强行扯下盖玻片，玻片可入温水中，让盖玻片自行脱落，然后重新封片，以防脂肪移位。
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