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黑色素染色

技术介绍


黑色素为内源性色素。正常情况下,存在于人体的毛发、皮肤、以及眼的虹膜、睫状体、脉络膜等处。在病理情况下,存在于成黑色素细胞以及肿瘤的黑色素细胞中。Masson--Fontana 氏黑色素染色法的基本原理是:硝酸氨银经黑色素的作用还原为黑色的金属银。


实验流程


脱蜡至水-黑色素染色-VG染色-脱水封片-显微镜镜检。


实验步骤


1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水浸洗3-5遍。

2、工作液孵育:切片浸入黑色素工作液并加盖,置于4℃避光反应12-18h,蒸馏水洗3遍。

3、复染VG:黑色素染液B 9ml加入黑色素染液C 1ml(配制后可反复使用多次)混合成VG染液(按比例配制用多少配多少),染1min,快速水洗,无水乙醇三缸快速脱水3s、5s、30s。

4、透明封片:两缸干净的二甲苯透明各20s、5min(二甲苯专用不与其他二甲苯共用),中性树胶湿封;

5、显微镜镜检,图像采集分析。


案例:实验结果展示



 

 


结果判读


黑色素黑色或者棕色,胶原纤维红色,背景黄色。


送样运输要求


1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

2.石蜡切片常温运输。


注意事项


配工作液和孵育时用的容器,在用之前必须用蒸馏水清洗干净,否则易出现杂质和沉淀。


黑色素染色
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