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黑色素染色
技术介绍
黑色素为内源性色素。正常情况下,存在于人体的毛发、皮肤、以及眼的虹膜、睫状体、脉络膜等处。在病理情况下,存在于成黑色素细胞以及肿瘤的黑色素细胞中。Masson--Fontana 氏黑色素染色法的基本原理是:硝酸氨银经黑色素的作用还原为黑色的金属银。
实验流程
脱蜡至水-黑色素染色-VG染色-脱水封片-显微镜镜检。
实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗，蒸馏水浸洗3-5遍。
2、工作液孵育：切片浸入黑色素工作液并加盖，置于4℃避光反应12-18h，蒸馏水洗3遍。
3、复染VG：黑色素染液B 9ml加入黑色素染液C 1ml（配制后可反复使用多次）混合成VG染液（按比例配制用多少配多少），染1min，快速水洗，无水乙醇三缸快速脱水3s、5s、30s。
4、透明封片：两缸干净的二甲苯透明各20s、5min（二甲苯专用不与其他二甲苯共用），中性树胶湿封；
5、显微镜镜检，图像采集分析。
案例：实验结果展示
结果判读
黑色素黑色或者棕色，胶原纤维红色，背景黄色。
送样运输要求
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输。
注意事项
配工作液和孵育时用的容器，在用之前必须用蒸馏水清洗干净，否则易出现杂质和沉淀。
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