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瑞氏姬姆萨染色
技术介绍
用于生物染色剂，如原生质的染色，染色目的多为观察凋亡细胞和血细胞，骨髓细胞以及受虐原虫或幽门螺旋杆菌感染的胃肠肺肝脾等组织。实验中多用于区分白细胞，并计数分析。
实验流程
涂片-瑞氏姬姆萨染色-脱水封片-显微镜镜检
实验步骤
1、涂片制备：取细胞悬液，离心，弃上清液，加适量PBS缓冲液，混匀后取适量滴于载玻片前端，另取一块边缘光滑的载玻片做推片，将其一端置于液滴前方，向后移动至接触液滴使液滴均匀分散在推片与载片的接触处。然后呈30-40°角均匀用力向另一端平稳地推出。涂片放置自然晾干。
2、瑞士吉姆萨染色：
2.1血涂片染色：
①取一张血涂片，组化笔沿着载玻片的边缘尽量画一个***的长方形；若是其它细胞涂片，则不需要画圈。
②滴加适量瑞氏染液(完全覆盖细胞即可)染色1min，用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液，至玻片流水呈无色即可；
③胶头吸管滴加10滴吉姆萨染色液染色30s(洗耳球轻轻吹打至染液完全覆盖细胞)
用胶头吸管直接滴加20滴瑞氏吉姆萨C溶液于吉姆萨染色液上染色2min(洗耳球轻轻吹打混匀)。用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液，至玻片上流水呈无色即可；
④稍微甩下载玻片上多余的水份，显微镜快速观察：白细胞胞核分叶清晰，部分白细胞胞浆着淡红色，红细胞呈红色圆饼状，无核，数量较多。立即将染好的涂片置于65℃烤箱烘烤4h以上 。
2.2组织石蜡切片染色：
①石蜡切片脱蜡至水，自来水洗5min；
②取一张切片，组画笔沿着载玻片边缘画大圈圈住组织，胶头吸管滴加10滴瑞氏染液染色2min，直接滴加0.5ml吉姆萨：瑞氏吉姆萨D溶液=1:19混匀的混合液于瑞氏染液上染色30s(洗耳球轻轻吹打混匀)；
③用盛装纯水的洗瓶冲洗组织上的染液，至玻片上流水呈无色即可；稍微甩下
载玻片上多余的水份，显微镜快速观察：肥大细胞呈紫红色，细胞核清晰呈蓝色，部分白细胞胞浆着淡红色，红细胞呈红色圆饼状，无核。立即将染好的涂片置于65℃烤箱烘烤4h以上
3、透明封片：干净的二甲苯5min，中性树胶封片。
4、显微镜镜检，图像采集分析。
实验结果展示
瑞氏姬姆萨染色
结果判读
涂片：红细胞呈橘红色圆盘状、无细胞核;白细胞胞核呈紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨;血小板为不规则细胞质小块、周边均匀呈浅蓝色，中央为细小的紫红色颗粒;中性粒细胞胞核呈紫蓝色，颗粒呈浅红色，形态多样;嗜酸粒细胞胞核呈紫蓝色，颗粒呈橘红色;嗜碱粒细胞胞核呈紫蓝色;淋巴细胞胞核呈蓝灰色，胞质呈淡蓝色;单核细胞胞核呈紫蓝色，胞质呈灰蓝色。
石蜡切片：红细胞呈橘红色圆盘状、无细胞核，血管周边纤维淡红色，细胞核蓝色，可见清晰核仁，肥大细胞紫红色。
注意事项
1、制作良好的涂片要求厚薄适宜，分布均匀，边沿整齐。
2、制作的涂片需要充分干燥以防脱片。
3、染色时间可根据染液浓度，室温高低，细胞多少来进行调节。
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