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TRAP染色

技术介绍


抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又称Trap染色,是用于检测骨、骨细胞中破骨细胞的染色,使破骨细胞呈红色,细胞核浅蓝色,用以显示破骨细胞的分布及数量变化。


实验流程


脱蜡至水—染液配制-Trap染色-苏木素浅染核-脱水封片-显微镜镜检


实验步骤


1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水洗三遍。

2、工作液配制:

Trap孵育液配制:

注:将TRAP染液B与TRAP染液C等比例混合,现配现用。标记为B液备用。

TRAP染液D 20mg用TRAP染液E 1mL溶解,标记为C液备用(C液需提前至少3天配置)。

Trap孵育液配制:TRAP染液A  18mL+B液 1mL+C液 1mL混匀,再加TRAP染液F  0.282g,充分溶解过滤后备用即为TRAP孵育液。

3、孵育染色:将切片用组画笔化圈后放在(加有一定量的防止切片蒸干的纯水)湿盒中,用蒸馏水37℃孵育2h,倾去蒸馏水,将切片重新放置在湿盒中,并滴加过滤好的现配的trap孵育液放于37℃烤箱孵育20min。

4、苏木素染色:倾去染液,水洗后,苏木素染液复染核15s,分化液分化,返蓝液返蓝。

5、脱水封片:常规脱水,透明,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。


案例:实验结果展示



 

 


结果判读


破骨细胞呈酒红色或浅红色,细胞核呈浅蓝色


送样运输要求


1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

2.石蜡切片常温运输。


注意事项


1、工作液配制过程中需充分溶解,现配现用。

2、染液应保存在4℃,使用前先复常温。

 


TRAP染色
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