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Goldner三色法染色
技术介绍
Goldner三色法染色主要是对骨组织的矿化骨与非矿化骨(类骨质)进行区分，其染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。此法主要用来观察骨缺损后修复过程中骨痂形成的过程。Goldner三色法与骨组织masson染色相比，前者主要区分矿化骨和非矿化骨，后者主要通过骨胶原的老化程度来判断骨组织的成熟度。
实验流程
脱蜡至水-三色法染液染色-脱水封片-显微镜镜检
实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、细胞核染色：Goldner染液A与Goldner染液B液等比混合，切片入混合液染色20min，自来水洗，1%盐酸酒精溶液分化2s，自来水冲洗，蒸馏水洗。
3、Goldner染液C：切片入***缸Goldner染液C浸染5-10 min，0.2%冰醋酸快速漂洗每缸3s。
4、Goldner染液D染色：切片入Goldner染液D浸染3min，显微镜下控制，以胶原处Goldner染液C褪色为准。
5、Goldner染液C染色：切片第二缸Goldner染液C染3-5min，0.2%冰醋酸快速漂洗每缸3s。
6、Goldner染液E染色：切片入Goldner染液E染3-5min，0.2%的冰醋酸三缸分化每缸2s，无水乙醇三缸脱水各2s、3s、5s。
7、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min，二甲苯透明5min，中性树胶封片。
8、显微镜镜检，图像采集分析。
案例：实验结果展示
结果判读
矿化骨呈绿色，非矿化骨呈橙红色，红细胞呈红色，细胞核呈紫黑色或灰黑色。
送样运输要求
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输。
注意事项
1、根据切片的数量对铁苏木素染液定期进行更换，也可以现配现用；
2、Goldner染液D与Goldner染液C的染色程度要控制好，胶原部分不能是太红，会影响Goldner染液D的着色；
3、冰醋酸分化Goldner染液E的过程中，要分化适当，不能过深或者过浅。
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