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凯氏带染色

技术介绍


凯氏带染色主要见于初生根内观察植物维管结构中的凯氏带,样本用卡诺固定液(乙醇:冰醋酸,G1120)固定后石蜡切片,根横切,苯胺蓝和小檗碱染色,荧光显微镜拍照。


实验流程


脱蜡至水—凯氏带染色—脱水封片—显微镜镜检


实验步骤


1、依次将切片放入二甲苯Ⅰ 20 min-二甲苯Ⅱ 20 min-无水乙醇Ⅰ 5 min-无水乙醇Ⅱ 5 min-75%酒精5 min,自来水洗。

2、切片入0.1%盐酸小檗碱染色液中避光染色1 h,水洗3-5次,吸干水分,切片于0.05%苯胺蓝染色液中避光染色30 min,水洗3-5次,吸干水分。

3、封片:滴加抗荧光淬灭封片液封片,盖盖玻片。

4、拍照:观察拍照,用荧光显微镜(DAPI滤光片)观察凯氏带,荧光易淬灭,应尽快拍照,注意避光,切片可短暂保存于4℃。


案例:实验结果展示


根横切 凯氏带染色

 


结果判读


在内皮层细胞的上、下壁和径向壁上,凯氏带呈亮蓝色的带状结构环绕细胞一周。


送样运输要求


1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。

切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。


凯氏带染色
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