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产品分类

完全性基因敲除小鼠

技术介绍



完全性基因敲除是通过基因敲除技术,把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。


模型应用


用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身生理病理的功能。


建系原则与流程


1、嵌合体小鼠鉴定:通过毛色判断嵌合体(黑白相间) ,黑色占的比例越大,嵌合率越高。

2、去除抗性基因 Neo:选择嵌合率高的嵌合体小鼠和Flp deleter小鼠杂交,PCR鉴定,获得去掉打靶载体中的 Neo 基因的F1 代(杂合子);

3、再挑选一对F1 代小鼠进行自交,通过 PCR 鉴定筛选得到去除Neo的纯合子的 F2 代 KO 小鼠(gene-/-)。**PCR 鉴定引物设计原则:根据Neo基因前后设计鉴定引物,鉴定Neo基因是否去除。