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胼胝质染色—苯胺蓝法

技术介绍


用于观察植物中胼胝质。


实验流程


脱蜡至水—胼胝质染色—苯胺蓝法染色—脱水封片—显微镜镜检


实验步骤


针对植物切片

1、切片制备:脱色后的叶片取材包埋切片后脱蜡至水,纯水洗涤三次。

2、切片染色:切片用洗涤液浸洗3次,甩干洗涤液,切入0.01%苯胺蓝染色液中常温避光浸染2 h。

3、封片:切片用洗涤液浸洗3次,吸干水分。滴加抗荧光淬灭封片液封片,盖盖玻片。

4、拍照:观察拍照,用荧光显微镜(DAPI滤光片)观察胼胝质沉积,荧光易淬灭,应尽快拍照,注意避光,切片可短暂保存于4℃。

针对叶片

1、脱色:新鲜的植物组织(幼嫩的叶片)用脱色液脱色处理。

2、染色:组织经洗涤液洗涤3-5次,滤纸吸干多余液,在0.01%苯胺蓝染色液中常温避光漂染2 h。

3、铺片及封片:组织经洗涤液漂洗3-5次,滤纸吸干多余液体并平铺于载波片上,滴加抗荧光封片剂,盖盖玻片并轻轻将组织压平不可有气泡。

4、拍照:观察拍照,用荧光显微镜(DAPI滤光片)观察胼胝质沉积,荧光易淬灭,应尽快拍照,注意避光,切片可短暂保存于4℃。


案例:实验结果展示


 


结果判读


胼胝质呈现亮蓝荧光广泛分布在筛管周围。


送样运输要求


1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。

 

胼胝质染色—苯胺蓝法
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