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鬼笔环肽染色
技术介绍
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合，通过藕联的荧光素分子，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比，鬼笔环肽无物种限制，染色特异性极强，染色区和未染色区对比性非常清晰，而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
实验流程
1.细胞固定并破膜：培养好的细胞爬片倒去培养基，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min.
2.加鬼笔环肽：爬片稍甩干后用组化笔在盖玻片中间细胞分布均匀的位置画圈(防止液体流走)，加50-100μl鬼笔环肽工作液，室温孵育2h，PBS洗3次，每次5 min。
3.DAPI复染细胞核：爬片用PBS(PH7.4)洗涤3次，每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min
案例：实验结果展示
送样运输要求
固定好细胞，换成PBS，4℃运输到实验室。目前只接受细胞爬片。
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