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石蜡切片

技术介绍


石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。


实验流程


(1)样本接收:组织蜡块

(2)实验步骤:将修整好的蜡块置于石蜡切片机切片,厚3-4μm。切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,载玻片将组织捞起,60℃ 烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

(3)实验结果:切好的玻片。


实验步骤


1、取材:新鲜组织用固定液固定24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。

2、脱水浸蜡:将脱水盒放进脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h,85%酒精2h,90%酒精2h,95%酒精1h,无水乙醇I 30min,无水乙醇II 30min,醇苯5-10min,二甲苯I 5-10min,二甲苯II 5-10min,65°融化石蜡I 1h,65°融化石蜡II 1h,65°融化石蜡III 1h。

3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机切片,厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,载玻片将组织捞起,60℃ 烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。


石蜡切片
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