外泌体（Exosomes）是一种直径在40～100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA ( microRNA，miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA（circular RNA，circRNA）。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA，具有完整的序列结构和生物活性。

常规的转录组分析仅通过Oligo (dT) 法对mRNA进行富集和分析，会导致包括环状RNA和相当比例LncRNA的丢失，无法准确、全面地反映真实的转录组信息。津科生物外泌体全转录组测序服务采用去核糖体的建库方案，同时检测样品中mRNA、LncRNA和环状RNA，获得全面的转录组信息，进而针对不同类型的RNA进行表达分析，结构研究，变异研究以及新转录本的发现。

一站式服务

客户只需提供细胞，组织，体液或总RNA，津科生物为您完成从样品准备，文库制备，上机测序到数据分析整套服务流程。

样本要求

（1）样品类型
细胞、体液、总RNA。其它类型样品请详询。
（2）样品量

a）血清：5 mL

b）血浆：5 mL

c）细胞上清：20 mL

d）体液：

唾液：15 mL

鼻涕：15 mL

尿液：100 mL

脑脊液：10 mL

e）外泌体总RNA 2 μg （OD260/280≥1.8；OD260/230≥1.5; 无明显降解，电泳检测样品特征性条带完整清晰，无明显弥散或拖尾）

（3）样品运输及保存

样品运输：样品置于1.5mLEppendorf管中，封口膜封好，干冰运输。

样品保存：细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存；血液样品应使用EDTA抗凝，不可用肝素；RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。

数据分析

1、差异表达mRNA/环状RNA/LncRNA筛选

根据高通量测序结果，筛选出（Fold Change≥2， P值≤ 0.05）差异表达mRNA/环状RNA/LncRNA。
注：Fold Change代表差异程度，P值代表差异的明显，筛选中采用的倍数变化会根据具体数据情况进行调整。

2、差异表达mRNA/环状RNA/LncRNA的聚类

3、差异表达mRNA/环状RNA/LncRNA的GO和信号通路分析

对差异mRNA/环状RNA/LncRNA的来源基因进行功能和信号通路富集分析，以便推断mRNA/环状RNA/LncRNA的功能。